几种常用渔药对泥鳅苗种的急性毒性试验
腾氏水产商务网-当代水产杂志社独家报道：
近年来，随着工业化程度的不断提高，尤其是有害金属的排放量日趋增加，水体污染也日趋严重，给水产养殖带来严重危害。目前，水产养殖逐渐转为集约化养殖模式，养殖密度不断上升，在高密度养殖条件下，随着排泄物、残饵的长期累积，造成有机物含量升高，导致水体中氨氮含量过高。在国际国内都高度关注食品安全，药物残留问题的大环境，水产养殖中也应使用合理剂量的药物来防治病害。在泥鳅的养殖过程中敌百虫、三氯异氰尿酸、溴氰菊酯和溴氯海因都是常用的渔药，本实验选用这4种渔药对泥鳅苗种进行急性毒性试验，研究这4种药物在不同浓度时分别对泥鳅苗种的影响，为泥鳅苗种培育阶段合理用药提供一些依据和参考。
急性毒性试验主要是指对试验动物一次给药后所带来的中毒症状及程度，症状出现的时间和持续时间，群体中个体死亡数量，计算出最大给药浓度、最小致死浓度、半致死浓度和安全给药浓度。
1 材料与方法
1.1 材料及试剂
1.1.1 试验动物
泥鳅苗种为自行培育的夏花，培育至3cm左右，从夏花培育池塘捕捞至实验室玻璃钢桶暂养，暂养期间不投饵，适量增加氧气。暂养用水与试验用水均是经过充分曝气的自来水，每天定时检查，清理受伤、体弱、行动迟缓和死亡个体。经3d的暂养，选择体质健壮的鳅苗进行试验。试验用鱼抽样测定体长为（x±sd）2.9±0.6cm；体重为（x±sd）0.165±0.12 g。
1.1.2 试验药品
试验药品由福州联丰生物技术开发有限公司提供。药品名称和主要成分见表1。
表1 试验用渔药种类
1.2 试验方法
试验容器为5l小水桶，试验时，每个试验桶加入2l充分曝气的自来水，试验期间水温28.0±1.5℃，溶解氧4.5~7.0 mg/l，ph值为7.1±0.1。将试验药品按照试验浓度所需，在使用前先配置成母液，液体药品直接添加。按设置浓度用移液器定量吸取母液稀释成所需浓度，通过48h预实验取得无死亡浓度和100%死亡浓度（表2）。在预实验得到的浓度范围内各试验药物分别设置5个等对数间距梯度浓度组和1个空白对照组进行正式试验，每个浓度设置2个重复组。每组放置试验鱼苗9尾，试验时间为96h。试验期间不投喂、不充氧，每2d更换1次试验溶液，每天定时观察，及时清理死亡个体，记录统计24h、48h、72h和96h的死亡数。
表2 泥鳅对常用药品的100% 死亡浓度和无死亡浓度
1.3 数据分析
参考相关数据统计方法文献，运用spss17.0版probit模块分析计算得出24h、48h、72h和96h半数致死浓度（lc50）；安全浓度（sc）=96hlc50×0.1，用microsoft excel2003进行换算， lc50为96h内引起试验动物死亡一半时的浓度。
2 结果与分析
2.1 中毒症状
不同药物试验组的泥鳅表现不同，溴氯海因实验组泥鳅游动迅速，呼吸急促，后慢慢潜伏于水底，直至死亡；三氯异氰酸实验组泥鳅绕桶壁在水面迅速游动，呼吸急促，慢慢呈垂直状或弯曲身体，直至死亡；敌百虫实验组泥鳅相对比较安静，无特别明显症状；溴氰菊酯实验组泥鳅表现出躁动不安，快速游动，出现侧翻、打转，游泳的平衡能力明显受影响，游泳速度也逐渐缓慢，反应逐渐迟钝，直至死亡；同种药物不同浓度实验组的泥鳅，随着浓度增大，泥鳅表现也越强烈，低浓度组的泥鳅中毒症状不明显，与对照组基本相似，多数喜沉底，缓慢游动，随着时间的延长才出现个别的死亡现象。泥鳅中毒死亡的判定标准为是否停止呼吸活动，用玻璃棒或小镊子刺激鱼体，无反应，用镊子夹住泥鳅，20s内不产生应激反应即为死亡。
2.2 半数致死质量浓度和安全浓度
根据试验计算出4种常用渔药对泥鳅苗种的24h、48h、72h和96h的半数致死质量浓度（lc50）和安全浓度（表3）。
表3 半数致死质量浓度和安全浓度
泥鳅苗种对溴氯海因、三氯异氰尿酸和敌百虫的耐受力较好，生产中实际常用剂量均低于安全浓度；溴氰菊酯高度敏感，建议生产中慎用或不用。
3 讨论
敌百虫是水产养殖中常用于杀灭各类寄生虫的药物，敌百虫溶于水后产生胆碱脂酶抑制剂，抑制胆碱脂酶活性，使动物神经中毒死亡。本试验中对泥鳅苗种的安全质量浓度（sc）为1.19mg/l，与于丹等（2010）江黄颡鱼幼鱼的1.14mg/l相近，高于李代金等（2010）黑尾近红鮊鱼苗的0.251mg/l，远高于房春英等（2009）斑点叉尾鮰的0.07mg/l和蔡永祥等（2007）澳洲宝石鲈的0.06mg/l，低于杨子江（1999）南方大口鲶的4.10mg/l。本试验用药品水产养殖中常规使用量是0.2mg/l，远低于敌百虫对泥鳅苗种的安全浓度，故敌百虫在泥鳅苗种培育中作为杀虫剂是相对安全的。
三氯异氰尿酸是强的氧化剂和氯化剂，是广谱、高效、较为安全的消毒剂，对细菌、病毒、真菌、芽孢等微生物都有杀灭作用，对球虫卵囊也有一定杀灭作用。本试验中对泥鳅苗种的安全质量浓度（sc）为1.50mg/l，高于房春英等（2005）孔雀鱼的0.233mg/l和孙翰昌等（2006）中华倒刺鲃的0.34mg/l和房春英等（2010）斑点叉尾鮰的0.62mg/l。本试验用药品水产养殖中常规使用量是0.15mg/l，远低于三氯异氰尿酸对泥鳅苗种的安全浓度，故三氯异氰尿酸在泥鳅苗种培育中作为杀虫剂是相对安全的。
溴氯海因是新型消毒剂，可替代含氯消毒剂，依靠溴的强杀菌能力，杀灭病原体，是理想的替代品，具有广谱、高效、安全无毒、低残留、无刺激性，不受水质环境影响等优点。本试验中对泥鳅苗种的安全质量浓度（sc）为4.00mg/l，高于宋文华等（2003）鲶鱼0.56mg/l和张耀武等（2009）黄颡鱼鱼种的0.86mg/l。本试验用药品水产养殖中常规使用量是0.15mg/l，远低于溴氯海因对泥鳅苗种的安全浓度，因此溴氯海因在泥鳅苗种培育中使用时安全，是一种具有广阔应用前景和值得推广应用的新型消毒。
溴氰菊脂是一种活性高、广谱、高效的杀虫剂，以触杀和胃杀作用为主，对甲壳类寄生虫和水体中浮游动物有较好的杀虫效果，水产养殖中常用作防治锚头鳋、鱼鲺等鱼病。本试验中对泥鳅苗种的安全质量浓度（sc）为0.0003ml/l，低于李代金等（2009）厚颌鲂鱼苗的0.003mg/l、向枭等（2000）黄鳝的0.0064mg/l和潘厚军等（2000）鲢的0.0022mg/l。由于溴氰菊脂对大多数水生动物比较敏感，对鱼类有剧毒，安全浓度都比较低，极低浓度就会引起水生生物致死。因此，在使用过程中一定要控制好剂量。本试验用药品水产养殖中常规使用量是0.03mg/l，远高于溴氰菊酯对泥鳅苗种的安全浓度，建议在泥鳅苗种培育疾病防治中不使用溴氰菊脂。
4 结论
试验表明，4种常用水产药物对泥鳅苗种的毒性大小依次为：溴氯菊脂>敌百虫>三氯异氰尿酸>溴氯海因。
敌百虫对泥鳅苗种24h、48h、72h和96h的半数致死质量浓度（lc50）分别为：16.684mg/l、16.298mg/l、12.812mg/l、11.973mg/l，安全浓度（sc）为1.19mg/l
三氯异氰尿酸对泥鳅苗种24h、48h、72h和96h的半数致死质量浓度（lc50）分别为：16.005mg/l、16.005mg/l、15.077mg/l、15.077mg/l，安全浓度（sc）为1.5mg/l；
溴氯海因对泥鳅苗种24h、48h、72h和96h的半数致死质量浓度（lc50）分别为：41.666mg/l、40.06mg/l、40.06mg/l、40.06mg/l，安全浓度（sc）为4mg/l；
溴氰菊酯对泥鳅苗种24h、48h、72h和96h的半数致死质量浓度（lc50）分别为：0.006ml/l、0.006ml/l、0.005ml/l、0.003ml/l，安全浓度（sc）为0.0003ml/l。
其中敌百虫、三氯异氰尿酸和溴氯海因在泥鳅苗种培育病害防治中作为常规用药是相对安全，可以使用。溴氰菊酯对泥鳅属于剧毒药品，不能在泥鳅苗种培育过程中使用。（何国森 陈度煌 林旋 王剑锋 李学贵 刘艳艳）
【福建省省属科研院所公益性专项（闽海渔科2013r002-4）】
本文选自《当代水产》
文章属腾氏水产商务网独家报道。转载请标注出处，违者追究法律责任，谢谢合作。
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急性毒性试验主要是指对试验动物一次给药后所带来的中毒症状及程度，症状出现的时间和持续时间，群体中个体死亡数量，计算出最大给药浓度、最小致死浓度、半致死浓度和安全给药浓度。
1 材料与方法
1.1 材料及试剂
1.1.1 试验动物
泥鳅苗种为自行培育的夏花，培育至3cm左右，从夏花培育池塘捕捞至实验室玻璃钢桶暂养，暂养期间不投饵，适量增加氧气。暂养用水与试验用水均是经过充分曝气的自来水，每天定时检查，清理受伤、体弱、行动迟缓和死亡个体。经3d的暂养，选择体质健壮的鳅苗进行试验。试验用鱼抽样测定体长为（x±sd）2.9±0.6cm；体重为（x±sd）0.165±0.12 g。
1.1.2 试验药品
试验药品由福州联丰生物技术开发有限公司提供。药品名称和主要成分见表1。
表1 试验用渔药种类
1.2 试验方法
试验容器为5l小水桶，试验时，每个试验桶加入2l充分曝气的自来水，试验期间水温28.0±1.5℃，溶解氧4.5~7.0 mg/l，ph值为7.1±0.1。将试验药品按照试验浓度所需，在使用前先配置成母液，液体药品直接添加。按设置浓度用移液器定量吸取母液稀释成所需浓度，通过48h预实验取得无死亡浓度和100%死亡浓度（表2）。在预实验得到的浓度范围内各试验药物分别设置5个等对数间距梯度浓度组和1个空白对照组进行正式试验，每个浓度设置2个重复组。每组放置试验鱼苗9尾，试验时间为96h。试验期间不投喂、不充氧，每2d更换1次试验溶液，每天定时观察，及时清理死亡个体，记录统计24h、48h、72h和96h的死亡数。
表2 泥鳅对常用药品的100% 死亡浓度和无死亡浓度
1.3 数据分析
参考相关数据统计方法文献，运用spss17.0版probit模块分析计算得出24h、48h、72h和96h半数致死浓度（lc50）；安全浓度（sc）=96hlc50×0.1，用microsoft excel2003进行换算， lc50为96h内引起试验动物死亡一半时的浓度。
2 结果与分析
2.1 中毒症状
不同药物试验组的泥鳅表现不同，溴氯海因实验组泥鳅游动迅速，呼吸急促，后慢慢潜伏于水底，直至死亡；三氯异氰酸实验组泥鳅绕桶壁在水面迅速游动，呼吸急促，慢慢呈垂直状或弯曲身体，直至死亡；敌百虫实验组泥鳅相对比较安静，无特别明显症状；溴氰菊酯实验组泥鳅表现出躁动不安，快速游动，出现侧翻、打转，游泳的平衡能力明显受影响，游泳速度也逐渐缓慢，反应逐渐迟钝，直至死亡；同种药物不同浓度实验组的泥鳅，随着浓度增大，泥鳅表现也越强烈，低浓度组的泥鳅中毒症状不明显，与对照组基本相似，多数喜沉底，缓慢游动，随着时间的延长才出现个别的死亡现象。泥鳅中毒死亡的判定标准为是否停止呼吸活动，用玻璃棒或小镊子刺激鱼体，无反应，用镊子夹住泥鳅，20s内不产生应激反应即为死亡。
2.2 半数致死质量浓度和安全浓度
根据试验计算出4种常用渔药对泥鳅苗种的24h、48h、72h和96h的半数致死质量浓度（lc50）和安全浓度（表3）。
表3 半数致死质量浓度和安全浓度
泥鳅苗种对溴氯海因、三氯异氰尿酸和敌百虫的耐受力较好，生产中实际常用剂量均低于安全浓度；溴氰菊酯高度敏感，建议生产中慎用或不用。
3 讨论
敌百虫是水产养殖中常用于杀灭各类寄生虫的药物，敌百虫溶于水后产生胆碱脂酶抑制剂，抑制胆碱脂酶活性，使动物神经中毒死亡。本试验中对泥鳅苗种的安全质量浓度（sc）为1.19mg/l，与于丹等（2010）江黄颡鱼幼鱼的1.14mg/l相近，高于李代金等（2010）黑尾近红鮊鱼苗的0.251mg/l，远高于房春英等（2009）斑点叉尾鮰的0.07mg/l和蔡永祥等（2007）澳洲宝石鲈的0.06mg/l，低于杨子江（1999）南方大口鲶的4.10mg/l。本试验用药品水产养殖中常规使用量是0.2mg/l，远低于敌百虫对泥鳅苗种的安全浓度，故敌百虫在泥鳅苗种培育中作为杀虫剂是相对安全的。
三氯异氰尿酸是强的氧化剂和氯化剂，是广谱、高效、较为安全的消毒剂，对细菌、病毒、真菌、芽孢等微生物都有杀灭作用，对球虫卵囊也有一定杀灭作用。本试验中对泥鳅苗种的安全质量浓度（sc）为1.50mg/l，高于房春英等（2005）孔雀鱼的0.233mg/l和孙翰昌等（2006）中华倒刺鲃的0.34mg/l和房春英等（2010）斑点叉尾鮰的0.62mg/l。本试验用药品水产养殖中常规使用量是0.15mg/l，远低于三氯异氰尿酸对泥鳅苗种的安全浓度，故三氯异氰尿酸在泥鳅苗种培育中作为杀虫剂是相对安全的。
溴氯海因是新型消毒剂，可替代含氯消毒剂，依靠溴的强杀菌能力，杀灭病原体，是理想的替代品，具有广谱、高效、安全无毒、低残留、无刺激性，不受水质环境影响等优点。本试验中对泥鳅苗种的安全质量浓度（sc）为4.00mg/l，高于宋文华等（2003）鲶鱼0.56mg/l和张耀武等（2009）黄颡鱼鱼种的0.86mg/l。本试验用药品水产养殖中常规使用量是0.15mg/l，远低于溴氯海因对泥鳅苗种的安全浓度，因此溴氯海因在泥鳅苗种培育中使用时安全，是一种具有广阔应用前景和值得推广应用的新型消毒。
溴氰菊脂是一种活性高、广谱、高效的杀虫剂，以触杀和胃杀作用为主，对甲壳类寄生虫和水体中浮游动物有较好的杀虫效果，水产养殖中常用作防治锚头鳋、鱼鲺等鱼病。本试验中对泥鳅苗种的安全质量浓度（sc）为0.0003ml/l，低于李代金等（2009）厚颌鲂鱼苗的0.003mg/l、向枭等（2000）黄鳝的0.0064mg/l和潘厚军等（2000）鲢的0.0022mg/l。由于溴氰菊脂对大多数水生动物比较敏感，对鱼类有剧毒，安全浓度都比较低，极低浓度就会引起水生生物致死。因此，在使用过程中一定要控制好剂量。本试验用药品水产养殖中常规使用量是0.03mg/l，远高于溴氰菊酯对泥鳅苗种的安全浓度，建议在泥鳅苗种培育疾病防治中不使用溴氰菊脂。
4 结论
试验表明，4种常用水产药物对泥鳅苗种的毒性大小依次为：溴氯菊脂>敌百虫>三氯异氰尿酸>溴氯海因。
敌百虫对泥鳅苗种24h、48h、72h和96h的半数致死质量浓度（lc50）分别为：16.684mg/l、16.298mg/l、12.812mg/l、11.973mg/l，安全浓度（sc）为1.19mg/l
三氯异氰尿酸对泥鳅苗种24h、48h、72h和96h的半数致死质量浓度（lc50）分别为：16.005mg/l、16.005mg/l、15.077mg/l、15.077mg/l，安全浓度（sc）为1.5mg/l；
溴氯海因对泥鳅苗种24h、48h、72h和96h的半数致死质量浓度（lc50）分别为：41.666mg/l、40.06mg/l、40.06mg/l、40.06mg/l，安全浓度（sc）为4mg/l；
溴氰菊酯对泥鳅苗种24h、48h、72h和96h的半数致死质量浓度（lc50）分别为：0.006ml/l、0.006ml/l、0.005ml/l、0.003ml/l，安全浓度（sc）为0.0003ml/l。
其中敌百虫、三氯异氰尿酸和溴氯海因在泥鳅苗种培育病害防治中作为常规用药是相对安全，可以使用。溴氰菊酯对泥鳅属于剧毒药品，不能在泥鳅苗种培育过程中使用。（何国森 陈度煌 林旋 王剑锋 李学贵 刘艳艳）
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