PDS，植物八氢番茄红素脱氢酶活性检测试剂盒【ELISA】
pds，植物八氢番茄红素脱氢酶活性检测试剂盒【elisa】
实验原理：
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中植物八氢番茄红素脱氢酶（pds）水平。用纯化的植物八氢番茄红素脱氢酶（pds）捕获抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被的微孔中依次加入植物八氢番茄红素脱氢酶（pds），再与hrp标记的检测抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物tmb显色。tmb在hrp酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的植物八氢番茄红素脱氢酶（pds）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（od值），通过标准曲线计算样品中植物八氢番茄红素脱氢酶（pds）活性。
试剂盒性能：
1.样品线性回归与预期浓度相关系数r值为0.95以上。
2.批内变异系数与批间变异系数应分别小于10%和15% 。
检测范围：
6.25 u/l - 200 u/l
灵敏度：
最低检测浓度小于1.0 u/l
操作步骤
标准品的加样：设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μl；。加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。加酶：每孔加入酶标试剂100μl，空白孔除外。温育：用封板膜封板后置37℃温育60分钟。配液：将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用。洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。显色：每孔先加入显色剂a50μl，再加入显色剂b50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。测定：以空白孔调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（od值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
注意事项：
试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间zui好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。请每次测定的同时做标准曲线，zui好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本od值大于标准品孔第一孔的od值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。底物请避光保存。严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。本试剂不同批号组分不得混用。10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。
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实验原理：
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试剂盒性能：
1.样品线性回归与预期浓度相关系数r值为0.95以上。
2.批内变异系数与批间变异系数应分别小于10%和15% 。
检测范围：
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灵敏度：
最低检测浓度小于1.0 u/l
操作步骤
标准品的加样：设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μl；。加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。加酶：每孔加入酶标试剂100μl，空白孔除外。温育：用封板膜封板后置37℃温育60分钟。配液：将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用。洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。显色：每孔先加入显色剂a50μl，再加入显色剂b50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。测定：以空白孔调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（od值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
注意事项：
试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间zui好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。请每次测定的同时做标准曲线，zui好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本od值大于标准品孔第一孔的od值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。底物请避光保存。严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。本试剂不同批号组分不得混用。10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。
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