是否进口否 | 产地上海 |
级别其它 | 含量100% |
品牌DM | 用途范围科研 |
产品名称冻干羊抗人C9血清 | 是否危险化学品否 |
货号 NF-250 |
冻干羊抗人c9血清
操作步骤
试管法(改良 mayer 法)
1、致敏羊红细胞: 2%绵羊红细胞加等量稀释后的溶血素( 1:2000),混匀,置 37℃水浴 30min。
2、稀释血清:待测血清 0.2ml,加应用液 3.8ml,稀释度为 1:20。
3、配制溶血标准管:全溶血管:2%绵羊红细胞 2ml 加 8ml 蒸馏水,混匀。
50%溶血管:取全溶血管液 2ml 加缓冲液 2ml。
4、按表所示,依次加各成分于试管中,混匀,置 37℃水浴 30min, 第 10 管为非溶血对照:补体 ch50 测定试管法
5、结果测定:取出试管, 2000r/min 离心 10min,对照管应不溶血。肉眼比色,选与 50%溶血标准管相近二管,再用分光光度计测(波长 542nm、 0.5cm 比色杯) od 值,
确定与标准管***接近者为终点管,然后按下公式计算 ch50 值:
血清补体 ch50( u/ml) =( 1/血清用量)×稀释度。
如第 5 管为终点管,测待测血清中ch50为66.7u/ml。血清补体ch50正常值为50-100u/ml。
冻干羊抗人c9血清
应用范围:
酶标试剂、免疫比浊试剂、免疫胶乳试剂生产、提取纯化抗体、组化实验中
对应抗原,或封闭对应杂抗体,测定对应抗原浓度,或抗原夹芯法测定对应
抗体,吸收杂抗原成分,层析纯化抗原,分析与鉴定对应抗原成分,封闭交
叉抗原,测定对应抗原成分,测定抗原纯度等。
1.液体抗血清保存原则:避免反复冻融
2.短期保存的抗血清:如几周内就会使用,收到后推荐在 2-8℃保存,2-8℃短暂保存
数周对活性没有影响。
3.长期保存的抗体:如抗体需超过 1 个月后才会使用,请酌情分装后于-20℃保存。
冻干羊抗人c9血清
常用标签包括有flag、myc、ha、his、gst、gfp、mbp等。
flag标签系统利用一个短的亲水性八氨基酸肽(dykddddk)融合到目标蛋白;其纯化条件是非变性的,因此可以纯化所有有活性的融合蛋白。
his标签是由6个组氨酸(his-his-his-his-his-his)组成的短肽,专门设计用于重组蛋白的吸附纯化。由于分子量小,且较容易分离和纯化,是目前使用***广泛的一种。
gst标签体系具有蛋白表达率高,表达产物纯化方便,利于gst抗体制备的特点。gst融合蛋白在水溶液中可溶,可从细菌裂解液中提取,在不变性的条件下通过亲和层析得到。
gfp或其突变体egfp等广泛用于基因表达效率的检测,以及和目的蛋白融合表达用于检测目的蛋白的表达和分别。gfp抗体不经可以检测gfp或其适当的突变体,也可以检测和gfp或其适当的突变体融合表达蛋白的表达、细胞内定位,以及纯化、定性或定量检测gfp融合表达蛋白等。
myc标签(序列为:eqkliseedl)已成功应用于wb杂交技术、免疫沉淀ip和流式细胞术中。因此可用于检测重组蛋白在细菌、酵母、昆虫细胞和哺乳细胞中的表达情况。myc重组蛋白质可通过偶联myc标签抗体到活化的琼脂糖上而进行亲和纯化。但myc重组蛋白的低ph洗脱条件往往会降低蛋白质的活力,因此myc标签系统广泛应用于检测但很少用于纯化。
ha标签系统利用一个ha(influenza hemagglutintin epitope:ypydvpdya)短肽融合到目标蛋白。ha标签可位于蛋白质的c端或n端,该系统已广泛应用于多种细胞类型,相应的ha标签抗体也被广泛运用。
mbp标签蛋白大小为40kda,由大肠杆菌k12的male基因编码。mbp可增加在细菌中过量表达的融合蛋白的溶解性,尤其是真核蛋白。如果蛋白在细菌中表达,mbp可以融合在蛋白的n端或c端。可用mbp抗体或表达的目的蛋白特异性抗体检测mbp标签标记的重组蛋白。
其余标签抗体还有v5、gfp、rfp、β-actin、β-tubulin、gapdh、erk1、au1、avi、b、cbp、ddddk、e、e2、glu-glu、hat、hpc4、hsv、kt3、klh、mat、protein a、s、s1、snap、srt、nwshpqfek、sumo、t7、tag-100、tap、trx、ty1、tf、universal、vsv-g等,但应用相对较少。
上海笃玛生物科技有限公司
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