聚合酶链式反应酶联免疫吸附分析法（PCR-ELISA）

聚合酶链式反应酶联免疫吸附分析法(pcr-elisa)
聚合链式反应(polymerase chain reaction,简称pcr),是用于放大特定的dna片段,在生物体外复制dna的分子生物学技术.elisa是免疫学测定中敏感和特异的检测方法的代表.pcr-elisa综合上述两方法,成为继pcr之后灵敏性更高,特异性更强,更省时易行的新检测方法,并且解决了pcr产物宣的问题,使得pcr在临床医学上得以应用.
pcr产物的生成量是以指数增加的.pcr能将pg=10-⒓g量级的dna起始待测模板扩增到微克(ug=10-⒍g)水平,能从100万个细胞中检测出一个靶细胞;在病毒的检测中,pcr的灵敏度可达3个空斑形成单位(plaque form-ing unit,简称pfu);在细菌的检测中,即使低至1个细菌的靶dna也能被检出.pcr是分子生物学中检测dna最普遍和灵敏的技术.pcr反应扩增出相关dna高拷贝数,以前用荧光素(溴化乙锭,简称eb)染色凝胶电泳进行检测,但无法定量.曾有人利用荧光素染色凝胶电泳的扫描照片进行光密度分析,希望通过光密度的变化实现pcr的定量,但由于荧光素染色凝胶电泳本身的检测结果不具有特异性,因此光密度分析无法获得精确定量的结果,这使得长期以为,pcr只能获得相对定量的结果,无法应用在临床医学上.科技的发展是相互影响的,酶联免疫吸附分析法(elisa)的出现启发了人们,为pcr的精确定量开辟了一条新的思路.在pcr扩增以后,利用elisa的原理和方法,使用酶标抗体,通过免疫吸附,酶促反应产物的分析来实现精确定量,这样的新方法被称为pcr-elisa.

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