台盼蓝染色细胞存活率检测试剂盒供应商

产品名称：台盼蓝染色细胞存活率检测试剂盒供应商
规格：100次
储存条件:—20℃,12个月
用途:又称培养细胞消化液,用于培养细胞的消化,或者一些组织的消化。
注意事项:无菌溶液，经过滤除菌处理。主要由胰酶或胰蛋白酶、edta组成,含酚红。自备材料：
1、 pbs、hanks液或无血清培养液
2、显微镜
3、离心机
操作步骤(仅供参考)：
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 pbs、hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量源叶生物 trypsin-edta solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min，不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 trypsin-edta solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落，直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
注意事项：
1、尽量减少反复冻融的次数，以免失效。
2、在使用 trypsin-edta solution 过程中，要特别注意避免消化液被细菌污染。
3、trypsin-edta solution 消化细胞时间不宜过长，否则细胞铺板后生长状况会较差。
4、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。使用说明：
1. 贴壁细胞的消化：
a.吸去培养液，用无菌的pbs、hanks液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
b.加入少量胰酶细胞消化液(含酚红，不含edta)，略盖过细胞，室温放置30秒至2分钟。不同的细胞消化时间有所不同。
c.显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来。此时吸除胰酶细胞消化液(含酚红，不含edta)。加入含血清的完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
d.如果发现消化不足，则加入胰酶细胞消化液(含酚红，不含edta)重新消化。如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落，直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000-2000g离心1分钟，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液(含酚红，不含edta)后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2. 组织的消化：
a.不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。附录：不同胰酶细胞消化液的比较和选择
1. 如果希望消化能力比较强，推荐选择c0201胰酶细胞消化液(0.25%胰酶)和c0203 胰酶细胞消化液(0.25%胰酶，含酚红)，这两种胰酶细胞消化液都含有edta，消化能力相对更强一些。
2. 如果希望观察比较方便，推荐选择含酚红的c0203 胰酶细胞消化液(0.25%胰酶，含酚红)和c0207 胰酶细胞消化液(0.25%胰酶，含酚红，不含edta)。
3. 对于酚红可能会干扰后续的测试分析，推荐选择不含酚红的c0201 胰酶细胞消化液(0.25%胰酶)和c0205 胰酶细胞消化液(0.25%胰酶，不含edta)。
4. 对于edta可能会干扰后续的测试分析时，推荐选择不含edta的c0205 胰酶细胞消化液(0.25%胰酶，不含edta)和c0207 胰酶细胞消化液(0.25%胰酶，含酚红，不含edta)。
5. 对于胰酶特别敏感的细胞，即对于消化时间特别快、消化时间比较难控制的情况，推荐选择c0202胰酶细胞消化液(0.05%胰酶)或c0204 胰酶细胞消化液(0.05%胰酶, 含酚红)。
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